Mayo Chiki tem a história baseada em uma Light Novel de mesmo nome, escrita por Asano Hajime. Konoe Subaru, de 17 anos de idade, serve a família Suzutsuki como mordomo. Suzutsuki Kanade, a pessoa qual Subaru serve, é idolatrada dentro de sua escola por ser uma das garotas mais belas. Devido a um acontecimento inesperado, Sakamachi Kinjirou descobre que Subaru é, na verdade, uma garota que finge ser um mordomo! De acordo com Kanade, Subaru irá perder a posição como mordomo se alguém da escola descobrir seu verdadeiro sexo. Kinjirou passa a ajudar Subaru em troca – também – de ajuda, pois ele tem muito medo de garotas por causa de sua irmã mais nova e sua mãe que é muito violenta.